参赛网友：superwen

是否采用密理博Immobilon转印膜（必填）：_已采用　　

PVDF膜孔径：0.22 uM / 0.45 uM （任选）： 0.22 uM

使用抗体（必填）：一抗：anti-phospho-Histone H3 (ser10)，Millipore, Cat.# 06-570,
二抗：IRDye 800CW anti-Rabbit Ig(H+L) antibody: LI-COR Biosciences, Cat: 926-32211

实验步骤（样品及检测底物必填）：
样品：肿瘤组织匀浆液，检测采用 Odyssey system (LI-COR Biosciences) 荧光成像

实验心得（选填，有助于获得选票）：

1，实验条件：对于17KD小分子蛋白，本实验电泳采用自制的15% SDS-Page gel，转膜采用Millipore的PVDF膜，0.22 uM， 200mA，30min，。
2，电泳上样量跟细胞中目的蛋白表达量以及抗体的敏感度都有关系，本实验上样10ug（总蛋白定量），一抗稀释比例在1：1000-1：5000均可，室温 2h，二抗 1：5000，室温1h。膜上是否有杂带跟一抗特异性有最直接的关系，从结果来看，一抗anti-phospho-Histone H3 (ser10)敏感度高，特异性好。
3，二抗标记近红外荧光报告基团IRDye 800CW，使用Odyssey system荧光成像，比普通化学发光方法更便捷。

参赛图片（附图，请清晰标注样品及对照）